赤苍藤(Erythropalum scandens Bl.)为铁青树科(Olacaceae)赤苍藤属(Erythropalum)常绿藤本植物，又名姑娘菜、腥藤等，国内主要分布在广西、广东、云南、贵州及西藏等地，常见于山区溪边、山谷、密林或疏林的林缘或灌丛中^[1]。赤苍藤是药食两用植物，全草入药，入肝、肾二经，性味平苦，主治肝胆赤热、黄胆、尿频、尿急、尿痛和小便不利等症，其嫩茎叶可作为蔬菜食用，能利尿排毒，是缓解痛风、消炎及抗氧化的药理食疗佳品^[1-3]。虽然民间素来有采集赤苍藤食用和药用的习惯，但目前对赤苍藤的研究还较为滞后，仅集中在营养成分^{[3, 4]}、化学组分^[5-7]、药理^[8-10]、栽培^[2]、扦插^[11-14]等方面。

作为新兴的药食两用植物，赤苍藤知名度近年来在华南地区逐步提升，市场需求量急剧增加。目前，赤苍藤的市场供应商品和扦插育苗材料主要来自野生植株，过度采摘严重影响了赤苍藤野生资源的可持续发展。赤苍藤供需矛盾日益激烈，对赤苍藤进行人工栽培已迫在眉睫。目前赤苍藤繁育方式主要是种子繁育和扦插繁育两种。赤苍藤扦插苗易受霉菌感染，总体成活率低，且成活的扦插苗一年仅开花3-5次，严重影响生长和产量，该繁育方式的推广受到极大的限制^[15]。因此，研究赤苍藤的种子繁育技术对赤苍藤的产业发展至关重要。本研究拟探讨浸种时间、播种深度、基质以及激素处理等关键因素对赤苍藤种子萌发和幼苗生长的影响，从而掌握赤苍藤的最佳育苗技术，以期为赤苍藤的种苗繁育和规模化栽培奠定基础。

1 材料与方法 1.1 材料

赤苍藤种子于2021年2月采于广西崇左市大新县桃城镇赤苍藤种植基地。在健壮植株上收集饱满的、果皮红色或淡红褐色的成熟果实，带回实验室及时取出种子待用。试验材料经广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所韦霄研究员鉴定为赤苍藤(Erythropalum scandens Bl.)的种子。

1.2 方法 1.2.1 种子形态特征观测

随机挑选完整的赤苍藤种子50颗，观察种子颜色，使用游标卡尺测量种子的长、宽，使用电子天平测量种子重(鲜重)、种仁重(鲜重)，并计算出种壳重、种仁重/种壳重。

1.2.2 不同浸种时间处理

消毒后的种子使用纯净水分别浸泡0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d，取出后播种于装有混合土(1/2肥土+1/2黄土，肥土为市售的营养土)的营养袋中。每个处理50颗种子，重复3次，且播种后根据实际情况，及时做好水分、遮光、除草等日常管理。后续其他处理的种子数量、重复次数以及日常管理方法同该处理。

1.2.3 不同基质含水量处理

将消毒后的种子直接播种于装有混合土的营养袋中，基质含水量分别为70%、50%、30%。

1.2.4 不同播种深度处理

设置4个播种深度，分别以0 cm、1 cm、3 cm、5 cm的深度将消毒后的种子播种于装有混合土的营养袋中。

1.2.5 不同光照处理

设置两个光照条件，分别为全黑条件和自然光条件。全黑处理为使用两个更大一号的营养袋，底部使用牙签戳小孔，错开排水孔重叠(两个营养袋底部保留一定空间以保证空气进入)，然后倒扣在播种的营养袋上，基质选用混合土。

1.2.6 不同基质处理

设置4种基质，分别将消毒后的种子播种于装有沙土、肥土、黄土、混合土的营养袋中。

1.2.7 赤霉素浸种处理

赤霉素浸种处理方法如表 1所示。赤霉素浓度设置5个梯度，2个浸种时间梯度(6 h和12 h)，共设置10个处理，基质选用混合土。

1.2.8 破壳处理

设置3个破壳处理，分别为不破(破壳率0%，完整种子)、少破(破壳率50%，即去掉一半种皮)和全破(破壳率100%，即去掉全部种皮)，由于赤苍藤种壳比较脆，破壳时只需要用指甲轻轻掐破就可去掉种皮。播种基质选用混合土。

1.2.9 幼苗性状测定

于2021年6月记录发芽数量，2021年8月对生长的赤苍藤幼苗进行性状测量。使用直尺测量幼苗的根长、枝高、叶长和叶宽，使用游标卡尺测量根粗、枝粗，并记录植株的叶片数。

1.3 数据分析

使用Excel 2019软件整理数据，使用SPSS 23.0软件进行描述统计分析、单因素方差分析(one-way ANOVA)以及多重比较分析(Duncan法)，种子形态的描述性统计值以平均值±标准差表示。

2 结果与分析 2.1 赤苍藤种子形态特征

赤苍藤果实及种子如图 1所示。赤苍藤成熟果实的果皮呈红色或淡红褐色，果肉呈蓝紫色，未洗去果肉风干的种子为蓝紫色，洗掉果肉风干的种子为蓝紫色或米黄色，形状近梭形或椭圆形。赤苍藤种子平均长(16.82±1.81) mm，种子平均宽(9.11±0.42)mm，种子平均重(0.70±0.13) g，种仁平均重(0.53±0.12) g，种壳平均重(0.17±0.04) g，种仁重/种壳重平均为3.12±0.78。

2.2 赤苍藤种子萌发及幼苗生长特性 2.2.1 浸种时间对种子萌发及幼苗生长的影响

不同浸种时间处理下赤苍藤种子的发芽率及幼苗性状如表 2所示。浸种时间对发芽率存在极显著影响(P < 0.01)。浸种5 d的赤苍藤发芽率为(55.33±6.43)%，极显著高于其他处理(P < 0.01)，而浸种1 d、2 d的赤苍藤发芽率未达20%。浸种时间对幼苗的根长、根粗、枝高、枝粗、叶片数和叶宽均不存在显著影响(P>0.05)，但对叶长有显著影响(P < 0.05)。6个浸种时间处理中，根长为[(5.7±2.1)-(10.0±5.2)] cm，根粗为[(1.73±0.29)-(2.55±1.06)] mm，枝高为[(16.6±5.0)-(20.1±3.4)] cm，枝粗为[(3.00±0.64)-(4.04±0.62)] mm，叶片数为(3.0±1.0)-(5.3±1.5)。浸种4 d处理的幼苗叶长显著大于浸种1 d和2 d (P < 0.05)，但与浸种0 d、3 d和5 d的幼苗叶长差异不显著。上述结果表明，播种时浸种5 d的赤苍藤可获得较高的发芽率和性状较优的幼苗。

2.2.2 基质含水量对种子萌发及幼苗生长的影响

不同基质含水量处理下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 3所示。基质含水量对种子的发芽率存在极显著影响(P < 0.01)。基质含水量50%和30%的发芽率均极显著高于基质含水量70%，有利于种子萌发。不同基质含水量对幼苗枝高存在显著影响(P < 0.05)，对叶宽存在极显著影响(P < 0.01)，而对其他幼苗性状不存在显著影响(P>0.05)。基质含水量50%处理下的幼苗枝高显著高于基质含水量30%。基质含水量70%处理下的幼苗叶宽最大，为(5.1±0.6) cm，极显著大于另外两个处理的叶宽(P < 0.01)。上述结果表明，基质含水量50%和30%有利于赤苍藤种子萌发，基质含水量50%和70%能为赤苍藤幼苗提供充足的水分以供其生长。

2.2.3 播种深度对种子萌发及幼苗生长的影响

不同播种深度处理下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 4所示。播种深度对种子发芽率存在极显著影响(P < 0.01)。播种深度为0 cm时，赤苍藤发芽率为(15.33±5.03)%；播种深度为1 cm的赤苍藤种子发芽率为(30.67±3.06)%，极显著高于其他播种深度的发芽率(P < 0.01)；当播种深度大于1 cm时，随着播种深度的增加，赤苍藤种子发芽率逐渐降低。播种深度对幼苗性状均不存在显著影响(P>0.05)。其中，根长为[(5.4±1.6)-(7.8±6.4)] cm，根粗最大为(2.51±0.64) mm，枝高最大可达(16.5±6.0) cm，枝粗为[(3.43±0.36)-(3.81±0.42)] mm，叶片数为(1.3±1.2)-(3.3±1.2)，叶长最长为(5.1±3.6) cm，叶宽最宽为(3.7±1.3) cm。上述结果表明，播种深度为1 cm时最适合赤苍藤种子萌发且播种深度对幼苗性状不存在显著影响。

2.2.4 光照条件对种子萌发及幼苗生长的影响

不同光照条件下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 5所示。两种光照条件下的发芽率不存在显著差异(P>0.05)，自然光条件下赤苍藤的发芽率为(25.33±8.33)%，全黑条件下的发芽率为(19.33±1.15)%。在不同光照条件下，全黑条件不支持幼苗生长，幼苗逐渐死亡。自然光处理下，平均根长为(9.3±3.0) cm，平均根粗为(2.16±0.36) mm，枝高和枝粗分别为(17.2±1.8) cm和(3.92±0.45) mm，平均叶片数为(4.4±1.6)，叶长和叶宽分别为(6.4±1.2) cm和(4.7±0.8) cm。上述结果表明，赤苍藤播种育苗时采用自然光照条件即可。

2.2.5 基质对种子萌发及幼苗生长的影响

4种基质处理下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 6所示。不同基质对赤苍藤的发芽率存在显著影响(P < 0.05)。混合土基质的发芽率最高，为(25.33±4.16)%，显著高于沙土和肥土基质的发芽率(P < 0.05)；黄土基质的发芽率为(20.00±2.00)%，与其他处理不存在显著差异。不同基质对幼苗性状均不存在显著影响(P>0.05)。幼苗根长为[(3.6±0.8)-(7.3±3.8)] cm，根粗为[(1.63±0.42)-(2.13±0.28)] mm，枝高最大为(14.3±3.0) cm，枝粗最大为(3.35±1.30) mm，叶片数为(3.0±1.0)-(6.5±1.9)，叶长最长为(6.1±1.4) cm，叶宽最宽为(4.2±1.0) cm。上述结果表明，使用混合土作为赤苍藤种子萌发基质可获得更高的发芽率。

2.2.6 赤霉素处理对种子萌发及幼苗生长的影响

不同赤霉素处理下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 7所示。不同赤霉素处理下的赤苍藤发芽率存在极显著差异(P < 0.01)。10个处理中，处理6(50 mg·L^-1，浸种12 h)的效果最佳，发芽率为(35.33±6.11)%，极显著高于其他处理(P < 0.01)；处理1，3，8，9的发芽率为(14.67±3.06)%-(20.67±9.45)%，各处理间不存在极显著差异；处理2，7，10极显著低于处理1，3，6，9的发芽率，与其他处理的发芽率差异不显著。赤霉素处理仅对叶长有极显著影响(P < 0.01)。处理5的叶长最长，为(7.9±1.3) cm，处理2叶长最短，为(4.3±1.2) cm。10个处理的根长为[(4.6±0.1)-(13.2±3.7)] cm，处理8根粗最大，为(2.25±0.70) mm，处理2最小，为(1.00±0.06) mm; 枝高为[(12.1±3.0)-(17.4±3.6)] cm; 枝粗最大为(4.36±0.37) mm，最小为(2.85±1.18) mm; 叶片数为(3.0±1.4)-(4.3±0.5，4.3±1.4);叶宽最大为(5.2±0.7) cm，最小为(3.8±1.7) cm。上述结果表明，使用50 mg·L^-1赤霉素浸种12 h可获得较高的发芽率且幼苗性状表现良好。

2.2.7 不同破壳处理对赤苍藤种子萌发及幼苗生长的影响

不同破壳处理下赤苍藤种子的发芽率和幼苗性状如表 8所示。不同破壳处理下赤苍藤的发芽率差异显著(P < 0.05)。全破处理的赤苍藤发芽率最高，为(45.33±4.16)%，显著高于少破和不破处理下的发芽率(P < 0.05)；少破和不破处理下的发芽率不存在显著差异。不同破壳处理下赤苍藤幼苗性状间差异不显著(P>0.05)。不同破壳处理的赤苍藤根长为[(5.8±1.2)-(7.9±1.2)] cm，最大根粗为(2.16±0.48) mm，最小为(1.83±0.30) mm；枝高最大为少破处理，为(20.2±5.0) cm，全破最小，为(16.5±4.0) cm；枝粗最粗为(3.26±0.46) mm; 叶长为[(6.4±1.6)-(6.7±1.4)] cm; 叶宽为[(4.9±1.3)-(5.2±1.6)] cm。上述结果表明，全破处理可显著提高赤苍藤的发芽率。

3 讨论

种子是植物的繁殖器官，种子的大小和形状对幼苗生长存在一定影响，在生产中对选种和播种都具有指导意义^[16]。本研究表明，赤苍藤种子形状近梭形或椭圆形，种子平均长(16.82±1.81) mm，种子平均宽(9.11±0.42) mm，种子平均重(0.70±0.13) g。该种子果肉含水量高，极易发霉，对萌发条件要求较高，故选育成熟度高、含水量相对较低的种子是种子育苗能否成功的关键。

不同的环境因素会影响种子的发芽率^[17]。本研究中赤苍藤种子直接播种的发芽率为(20.67±8.08)%，浸种5 d的发芽率可达(55.33±6.43)%，在所有处理中发芽率最高，说明赤苍藤种子吸水慢，在播种育苗时可适当延长浸种时间，既能提高发芽率又不影响幼苗的正常生长。基质含水量30%和50%的赤苍藤发芽率分别为(35.33±6.11)%和(35.33±5.03)%，极显著高于基质含水量70%的发芽率，主要是由于赤苍藤种子本身含水量较高，在高湿度的基质中容易发霉，但幼苗生长时，保持50%-70%的基质含水量有利于幼苗枝高的生长，所以在萌发期应控制基质含水量，以防加重种子霉化，在种子发芽后应适量浇水，保持适中的水分供植株生长。赤苍藤种子播种深度为0 cm或者深度大于1 cm时的发芽率均低于播种深度为1 cm时的发芽率，且随着深度的增加，发芽率逐渐下降。该结果与韦剑锋等^[18]对麻疯树(Jatropha curcas L.)种子、张彤等^[19]对武当木兰(Magnolia sprengeri Pampan.)种子的研究结果类似，可能是由于覆土深度大、基质含水量大导致种子发霉或是种子呼吸作用遭受影响，但播种深度对幼苗性状不存在影响。综合考虑，在育苗时，选择播种深度1 cm较适宜。不同的物种种子萌发对光照的要求不同，但植物的生长需要光照^[20]。赤苍藤种子在自然光照和全黑条件下的发芽率不存在显著差异，但全黑条件不适宜幼苗的生长，所以在生产上于自然光照条件下育种即可。不同的基质处理下赤苍藤种子的发芽率存在显著差异，混合土的发芽率最高，为(25.33±4.16)%，可能是因为混合土的保水性以及通透性较好，更适于赤苍藤种子的萌发。虽然4种基质的幼苗性状不存在显著差异，但从结果来看，肥土中幼苗的根长、根粗、枝粗以及叶片的长势表现稍好，可能是因为肥土土质疏松且肥沃，能为根系及植株的生长提供充足的养分，因此在幼苗移栽时应注意保证土壤的通透性和肥力，有利于植株生长。

目前，打破种子休眠的方法主要有化学方法和物理方法^[21]，本试验研究了赤霉素浸种和破壳两种不同的处理方法，结果显示50 mg·L^-1的赤霉素浸种12 h的发芽率为(35.33±6.11)%，能有效提高种子的发芽率，缩短浸种时间。另外，种皮的通透性也会影响种子的吸水和透气功能，大多数种子的种皮机械障碍会影响种子萌发^{[22, 23]}，试验中全破处理的赤苍藤种子的发芽率为(45.33±4.16)%，说明赤苍藤种壳对种子的萌发存在一定程度的物理抑制作用，加上赤苍藤种子含水量高，如短期内未能破壳则极易发霉。因此，利用机械破壳方式能显著提高赤苍藤的发芽率。幼苗的性状测量结果显示，赤霉素浸泡或破壳处理不仅不会抑制幼苗的生长，而且能提高发芽率，在生产应用中可按需择优选择处理方法。

4 结论

本研究结果表明，对赤苍藤进行育苗时，可对赤苍藤种子进行浸种5 d或使用50 mg·L^-1的赤霉素浸种12 h的方法来提高发芽率，并将处理的种子按1 cm播种深度播种于基质含水量为30%-50%的混合土基质中，待发芽后保持土壤湿润有利于植株生长。本研究使用单因素试验方法对赤苍藤的种子萌发特性以及幼苗性状进行了探究，无法得出各处理间相互作用的结果，后续可采用多因素的正交试验来探索赤苍藤发芽率的最优处理组合，为赤苍藤的规模化种植提供理论依据。另外，赤苍藤种子极易发霉，如何控制种子质量以及降低种子霉变也是提高赤苍藤育种成功率的关键。