广西科学院学报  2016, Vol. 32 Issue (3): 221-225   PDF    
三种马尾藻的营养组成分析*
詹冬梅1,2 , 王翔宇1,2 , 辛美丽1,2 , 吕芳1,2 , 吴海一1,2     
1. 山东省海洋生物研究院,山东青岛 266104;
2. 青岛市大型海藻工程技术研究中心,山东青岛 266104
摘要: 【目的】 为扩大马尾藻应用范围,提高其开发利用价值,对山东荣成鼠尾藻、海黍子及铜藻等3种马尾藻的主要营养组成及功能活性成分物质进行研究。【方法】 测定分析马尾藻中的蛋白质、粗脂肪、粗纤维、不溶性膳食纤维、氨基酸、微量元素、褐藻胶、褐藻淀粉、岩藻黄素等成分的含量。【结果】 3种海藻的微量元素含量丰富,其他物质的含量如下:粗蛋白14.1%~19.1%,粗脂肪1.8%~2.5%,粗纤维5.4%~9.6%,不溶性膳食纤维14.7%~19.6%,褐藻胶12.4%~26.2%,褐藻淀粉0.04%~0.38%,岩藻黄素0.26~0.74 mg/g,褐藻多酚1.34~6.48 mg/g,甘露醇0.43%~0.45%。【结论】 3种海藻属于蛋白质适中、脂肪低、膳食纤维高、其他活性成分较高的藻类,可作为良好的食品添加剂及海藻活性成分提取的原料。
关键词: 马尾藻     营养组成     活性成分    
Nutritional Constituents of Three Kinds of Sargassum
ZHAN Dongmei1,2 , WANG Xiangyu1,2 , XIN Meili1,2 , LV Fang1,2 , WU Haiyi1,2     
1. Marine Biology Institute of Shandong Province, Qingdao, Shandong, 266104, China;
2. Macroalgae Engineering Technology Centre of Qingdao, Qingdao, Shandong, 266104, China
Abstract: 【Objective】 To extend the application fields and increase utility value of Sargassum,the primary composing components and functional components of three kinds of Sargassum collected from Rongcheng coastal zone were studied. 【Methods】 The contents of the protein,crude fats,crude fiber,insoluble dietary fibre,amino acids,trace elements,alginate,laminaran and fucoxanthin were measured and analysised 【Results】 Trace elements in the three kinds of Sargassum were as follow,protein 14.1%~19.1%,crude fats 1.8%~2.5%,crude fiber 5.4%~9.6%,insoluble dietary fibre 14.7%~19.6%,alginate 12.4%~26.2%,laminaran 0.04%~0.38%,fucoxanthin 0.26~0.74 mg/g,algae polyphenol 1.34~6.48 mg/g,mannite 0.43%~0.45%. 【Conclusion】 The three kinds of Sargassum were the algae with moderate protein,low fat,high insoluble dietary fibre and high active composition.They could be used as raw materials of food additives and active components.
Key words: Sargassum     composing compenent     active component    
0 引言

【研究意义】鼠尾藻(Sargassum thunbergii)[1-2]、海黍子(Sargassum muticum)及铜藻(Sargassum horneri)等是一类具有较高经济价值的褐藻新资源,它们不仅是藻胶工业的优质原料,也是制备医药、食品、饲料、有机肥等的优质原料。该类褐藻在我国近海分布广泛,是海藻场及海底森林的主要组成部分。大部分的马尾藻一般不直接食用,但可以广泛用于饲料、藻胶和医药行业。海藻中含有丰富的维生素,如脂溶性维生素A、D的前体,维生素E、K,水溶性维生素B1、B2、B3、B12以及维生素C等。褐藻胶是褐藻细胞间质多糖的主要成分,具有高分子阴离子化合物的特性,是维持褐藻生命活动所必须的基础物质,其主要成分为多聚甘露糖醛酸(M)和多聚古罗糖醛酸(G)所构成的高分子化合物,它主要用作食品、纺织、橡胶、医药等工业的助剂。褐藻中岩藻聚糖硫酸酯具有抗凝血、降血脂、抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫机制等多种生理活性,在工业、农业、环保、轻工、食品、医疗等领域有重要的应用价值。褐藻中的岩藻黄素属于类胡萝卜素类的化合物,对光不稳定,易被氧化,具有优越的抗氧化作用和抗肥胖、抗肿瘤、调节血糖含量和清除自由基等活性。褐藻多酚是海藻体内的化学防御物质,分子量从几百到几十万,具有多种化学及生物活性:络合金属离子;抑制淀粉酶、酯酶、抗血纤维蛋白溶酶活性;抑制微生物生长;抑制附生藻类生长;抑制植食动物摄食;凝集血红细胞[3]。在高度不饱和脂肪酸的抗氧化实验中发现,褐藻多酚比目前常用的抗氧化剂BHT的抗氧化活性高2.5倍[4]。【前人研究进展】目前已有报道研究大连海黍子[5]、海南马尾藻[6]、广东亨氏马尾藻[7]、浙江一种马尾藻(羊栖菜)[8]的基本营养成分,如氨基酸、微量元素、维生素等,但有关马尾藻中褐藻胶、岩藻黄素、褐藻多酚这些活性成分分析资料较少。【本研究切入点】每种马尾藻的营养组成有着较大的差异,因此本研究采集山东荣成自然资源量较大的3种马尾藻,对其主要营养组成及功能活性成分物质进行测定及分析。【拟解决的关键问题】扩大马尾藻这一大型经济藻类的应用范围,提高其开发利用价值,为充分开发利用海藻资源提供一定的科学理论参考。

1 材料与方法 1.1 海藻的采集与处理

2015年6月采集荣成俚岛湾海洋科技有限公司潮间带生长的鼠尾藻,潮下带生长的海黍子,以及筏架上漂浮生长的铜藻。所有采集的海藻用过滤海水洗刷后,60℃烘干,装入自封袋中,置于冰箱中冷冻保存。

1.2 方法 1.2.1 一般组分的含量测定

粗蛋白的含量测定采用经典的凯氏定氮法;粗脂肪的含量测定采用索氏抽提法;粗纤维的含量测定采用重量法;灰分的测定采用560℃煅烧法;不溶性膳食纤维的含量测定采用国家标准GB 12394-90。

1.2.2 氨基酸含量测定

海藻样品用2 mL 5 mol/L盐酸110℃水解24 h后过滤,所得滤液用真空泵40℃抽干;再用pH值5.5的磷酸缓冲液稀释到一定体积,摇匀,取一定量的水解样品用氨基酸自动分析仪进行测定。

1.2.3 微量元素以及维生素含量测定

微量元素含量的测定:海藻样品用HNO3-HClO4混酸消解至无色透明,用双蒸水定容至一定体积,备用。用原子吸收光谱仪测定微量元素Cu、Fe、Zn的含量,用荧光分光光度法测定元素Se的含量(海洋监测规范生物体分析GB 17378.6-1998)。

维生素B1的含量采用国家标准GB/T 5009.84-2003测定,维生素B2的含量采用国家标准GB/T 14701-2002 测定。

1.2.4 海藻多糖的含量测定

褐藻胶的含量测定参考文献[9]中所使用的醋酸钙法。褐藻淀粉和硫酸多糖的含量测定采用硫酸苯酚法,所用提取方法如下:取10 g海藻干粉,加20 mL甲醇脱色3次后,用80℃热水提取2 h;5 000×g离心后,收集上清液旋转浓缩;然后加入10 mL 50%(V/V)乙醇,离心收集沉淀,即为褐藻淀粉;上清液中再加入10 mL 80%(V/V)乙醇沉淀,收集沉淀物,为硫酸多糖。

1.2.5 其他生物活性物质的含量测定

(1)甘露醇

采用硫代硫酸钠滴定法:海藻用蒸馏水浸泡24 h,将提取液浓缩沉淀,置于碘瓶中,加入3.2 g/L高碘酸钠溶液及硫酸溶液(水∶浓硫酸=1∶20,V/V),50℃水浴加热15 min,放冷。加入16.5%(W/V)碘化钾液,放置5 min,用0.1 mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定,至近终点时,加入1%(W/V)淀粉溶液1.0 mL使溶液呈蓝色,再继续滴定至蓝色消失。每1.0 mL硫代硫酸钠滴定液(0.1 mol/L)相当于1.821 8 mg甘露醇。

(2)岩藻黄素

准确称取1.05 g马尾藻干粉,用20 mL甲醇在60℃的条件下避光静置,浸提2次,每次1 h。浸提液冷冻离心后留取上清液并转入分液漏斗中,缓慢加入正己烷,充分震荡,放置分层,保留上层溶液;再用正己烷对下层甲醇水溶液进行萃取,直至不能再从下层中萃取出黄素物质为止,最后舍掉下层,合并所得的上层溶液。在岩藻黄素特定吸收波长450 nm下测吸光度值,按下式算出岩藻黄素含量:

岩藻黄素(mg/g)=(A455×n×1 000)/(A1 cm1%×M×100),

式中:A455为样品在445 nm处的吸光值;n为稀释倍数;A1 cm1%为在1 cm光程长的比色皿中1 g/L岩藻黄素的理论吸收值,即1 600;M为样品重量,g。

(3)褐藻多酚

准确称取2 g干样品,加50 mL蒸馏水,于121℃条件下提取15 min。提取液 3 000 r/min离心20 min,用蒸馏水将上清液定容至50 mL得到热水提取的褐藻多酚溶液。然后加入3倍体积的95%(V/V)乙醇溶液进行沉淀,静置10 min后进行离心,旋转蒸发出上清液中的乙醇,浓缩液加蒸馏水定容至50 mL,得到褐藻多酚溶液。取1 mL褐藻多酚溶液置于15 mL试管中,加水稀释至7 mL,混合均匀,加入1 mL Folin-Denis试剂摇匀,3 min后加入2 mL饱和碳酸钠溶液,充分混合,3 h后于710 nm测定吸光值。用1%(W/V)间苯三酚标准液按上述方法做出标准曲线,样品测得的710 nm处吸光值代入标准曲线公式中即可求得褐藻多酚含量。

Folin-Denis试剂为磷酸钨铝复合物:将20 g钨酸钠,80 g磷钼酸钠,50 mL (85%,V/V) 磷酸溶液及750 mL水混合,加热回流2 h,冷却后加水定容至1 L。

2 结果与分析 2.1 3种马尾藻的一般组成含量

已报道的海藻中蛋白质含量一般在20%以下[10],从表 1可以看出,本试验中3种海藻的粗蛋白含量为14.1%~19.1%,高于海带(6.4%)[10];其中,鼠尾藻与海黍子中粗蛋白含量比较高,与羊栖菜(15.3%)及裙带菜(17.2%)的粗蛋白含量[8]接近,而铜藻中粗蛋白含量在3种海藻中最低。另外,鼠尾藻与海黍子的粗纤维含量相对低于铜藻;3种海藻的脂肪含量都比较低。总体上来说,海黍子与鼠尾藻的基本营养成分组成比较接近。

表 1 3种马尾藻的主要成分组成 Table 1 The primary composing components of three kinds of Sargassum

粗纤维仅包含部分纤维素、半纤维素、木质素及少量含氮化合物,而膳食纤维包含纤维素、半纤维素、戊聚糖、木质素、果胶、树胶等,因此膳食纤维比粗纤维更能客观、准确地反映食物的可利用率。鼠尾藻、铜藻的不溶性膳食纤维含量比较高,可作为强化纤维配方食品的添加剂。另外,受实验条件限制,我们只测定3种海藻中维生素B1、B2的含量,结果显示3种海藻中维生素B2的含量较高(表 1)。

2.2 蛋白质的氨基酸组成及含量

表 2可知,马尾藻含有17种氨基酸,缺少色氨酸。鼠尾藻、海黍子、铜藻氨基酸总量分别是16.5 g/100 g、15.4 g/100 g、16.95 g/100 g,必需氨基酸含量分别是5.27 g/100 g、5.70 g/100 g、5.30 g/100 g;必需氨基酸占总氨基酸量的比例分别为31.9%,37.0%,31.3%。WHO推荐的理想蛋白质模式是必需氨基酸占总氨基酸的40%左右,海黍子的氨基酸组成比较接近这一要求。

表 2 3种马尾藻蛋白质的氨基酸组成及含量(g/100 g) Table 2 Amino acid compositions in the three kinds of Sargassum (g/100 g)
2.3 微量元素及维生素含量

海藻中含有海水中所有的无机元素,其中K、Na、Mg、Ca、Cl含量很高,是无机元素的宝库,这些无机元素在人体内参与生命过程,起着非常重要的作用。海藻有将海水中元素浓缩的能力,比如铁在海水中含量一般为0.01 mg/kg,而本试验所测得的3种马尾藻铁含量为110~426 mg/kg。从表 3可以看出,3种海藻的微量元素含量比较丰富,特别是铁的含量远高于海带(39 mg/kg)[11],但低于报道的亨氏马尾藻(500 mg/kg);硒的含量比亨氏马尾藻高(30 μg/kg)[7]

表 3 3种马尾藻的微量元素及维生素含量 Table 3 The trace elements and vatamin B content of the three kinds of Sargassum
2.4 褐藻多糖的含量

褐藻多糖主要分为细胞间质多糖及细胞内贮藏多糖,褐藻间质多糖包括褐藻胶及硫酸多糖,细胞内贮藏多糖多为淀粉类物质。

本试验海藻中褐藻胶含量为12.4%~26.2%,其中鼠尾藻的褐藻胶含量最高,鼠尾藻及铜藻中的褐藻胶含量与海带褐藻胶含量(24.5%)[11]接近(表 4)。从马尾藻提取的褐藻胶与从海带中提取的褐藻胶在分子量、凝胶强度等特征上有很大的差异,用途不尽相同,目前从马尾藻提取的褐藻胶在市场上比较紧缺。褐藻淀粉是褐藻细胞内储存多糖,在所测3种马尾藻中,其含量都很低(表 4)。

表 4 3种马尾藻中的褐藻胶与褐藻淀粉含量(%) Table 4 The alginate and laminaran content of the three kinds of Sargassum(%)

比较发现,铜藻的岩藻聚糖硫酸酯含量最高,其次是海黍子,鼠尾藻含量最低。从岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成(表 5)中可以看出,海黍子和铜藻中的岩藻糖含量最高,达到27%以上,而鼠尾藻中的岩藻糖含量比较低;鼠尾藻中甘露糖含量最高。同时,海藻岩藻聚糖硫酸酯中还含有微量的葡萄糖醛酸、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖和木糖。

表 5 3种海藻的岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成(%) Table 5 The monosaccharide composition of fucose-containing sulfated polysaccharides of the three kinds of Sargassum(%)
2.5 其他活性成分含量

表 6可以看出,铜藻中岩藻黄素含量比较高,达到0.74 mg/g,比文献中报道的海带岩藻黄素(0.556 mg/g)高,比裙带菜岩藻黄素(1.21 mg/g)低。鼠尾藻及海黍子的褐藻多酚含量比较高。3种海藻的甘露醇含量接近,均比海带的甘露醇含量(7%以上)[12]低。

表 6 3种马尾藻中活性成分含量 Table 6 The active component contents of the three kinds of Sargassum
3 结论

鼠尾藻及铜藻的褐藻胶、岩藻黄素及不溶性膳食纤维含量高。海黍子氨基酸组成比较接近WHO推荐的理想蛋白质模式,可作为强化纤维配方食品的添加剂;海黍子中褐藻多酚及岩藻糖含量较高,是功能活性成分优良的海藻,可作为功能活性成分提取的原料,广泛应用于医药上。

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